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當前位置:首頁技術文章對于剛使用的液相色譜柱應該怎么進行維護

對于剛使用的液相色譜柱應該怎么進行維護

更新時間:2022-07-08點擊次數:2056
液相色譜柱是一種用于液體色譜分析儀器。Kromasil系列液相色譜柱具有重現行性好,使用壽命更長的特點,更好的滿足制藥企業和藥物研發對液相色譜柱的嚴格要求。Kromasil是一種高純度、大比表面積、高機械強度、較高的碳鏈覆蓋率的新一代球形硅膠填料。金屬不純物含量極低,減少了有些螯合物在硅膠基質柱上的絡合作用。 Kromasil的表面有*的硅羥基基團組成,硅烷的覆蓋率高,在高或低的pH條件下不易水解和分解。它允許流動相pH為1.5-9.5。
新的液相色譜柱應該怎么進行維護?
新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩定,再進行正式進樣測定。如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
影響因素:
A:物理因素
1.硅膠純度--填料硅膠的純度與殘留金屬離子濃度
2.色譜柱尺寸--填料床的長度和內徑
3.顆粒形狀--球型或不規則型
4.粒徑--平均顆粒直徑,通常3-10μm
5.表面積--顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/gram表示
6.孔徑--顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍80-300Å
B:化學性質
1.鍵合類型--單體鍵合-鍵合相分子與基體單點相連
2.碳覆蓋率--與基體物質相連的鍵合相的量
3.封端--鍵合步驟之后,用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來
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